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1 致流產和抗半孕作用 給孕期10一12d4、圍出r注射天花粉蛋白粗制劑o 2m8/只.5d后止孕有效率在75%U1—,給孕期30d U[:的犬肌降o.5m5/k5.可使胎犬死亡jf煥川’。給孕期14d左右的家免肌內注射4mB/R或陰道內咕藥32nM/只.也臺致流產作用”。結晶天花粉蛋65B質傅H F[。)昭腔注射抗早孕刑且為2矽X,N單純天花粉劑旦為40vd嘆.其抗孕軍各為66.7%與70%,小鼠腹腔注入8y8/5沖L混懸液.其抗早孕率為83.3%,說明小劑量TPL即有明顯的抗于學活性’《。注射用天花粉能促進妊娠后朋大鼠娩出gf版,斤增強其在位子宮的自發活動,還可提高妊娠大鼠子宮P(;F2。合且,對動物血漿和子宮單酮濃度則無明顯影響。結果提水,該巧促進子宮KFz,合成相釋放是增強妊娠子宮自發沼功的重要原因”i c天花粉能增強假孕兔的子宮自發活動,并增強r官肌殺討15—M,PGF2。和催產紊的反應,但討假孕免的子真PGF2。和PGE含量、子宮肌離體釋放量以及子宮組織形態舉北明顯影qq,提示天花檢增強妊娠子宮活動還存在胎仔胎盤劉F宮的閉F2。和服無關的作用途徑“,。體外培養試驗,天友粉蛋白對孕期5d的免胚泡有損傷作用‘M。注射于早孕免亦有r10顯的航早孕作用,可使胚泡壞死、液化,終致完全吸階“。A花粉逝EI引74;作用原理認為是:①天花粉蛋白直接作用于胎盤的滋養層細胞.并有一定的細胞專一性s⑦天花粉蛋白能選招地使胎盤絨毛合體滋養層細胞變性壞死,解體的細胞碎塊留在Kn竇小.引起凝血.造成循環陋礙和進一步的大量組織壞死,gf盤絨毛壞死是原發的.循環陳礙是繼發的;③胎盤絨毛的損佐反映/t功能方面、HcG和團體激素迅速下降到先兆流產的臨男水平以卜由1:胎盤形態和功能嚴重損傷的結果.破壞7母舒祁胎兒之間的內分泌關系和代謝物的交換,并假定可能通過演未弄清楚的機制,引起前列蹤索合成的增加,發動官縮而導致流產”,此外,天花粉蛋白可提高于富對垂體后葉索的敏感性,外使小鼠離體子宮.免在體子宮及慢性子宮接管收縮增強,通月對子宮平滑肌的直接興奮作用而導致流產”uM。
2 抗組作用 天花粉蛋白對滋養層細胞和絨癌細胞高旗專 的親和件,具有特殊的細胞毒作用,并證明天花粉蛋白對蜒如他的原韌損傷部位是筷糖體“;1M。滅花粉蛋白可抑制民9t感性腫項(MDL 2)的生RL“i。接種艾氏阻水煩細胞后.腹控注射天花粉o 2mV只(5Hdk8)的小鼠無明顯脂水,生存期明顯婦長“、腹腔注射5m8/k8,對小鼠實驗性肝癌腹水型也有一定治療作用.可減少膠水量,延長存活期。對移植性肝癌實體瘤世商輕度NI制作用‘M。天花粉o.2mB/只腹腔注射.可增強荷殖小鼠紅細胞路附免疫復合物的能力,抑制艾氏膠水田細胞生長“、梢制天花檄蛋白對離體絨癌細胞增殖的抑制濃度t認為160P8/m1,巾結晶大花粉蛋白IDb為3.3P8/m[,天花粉多蹬Ibu則為70 oy8/m1MM。天花粉蛋白體外pJ抑制肺癌細胞禍(As‘?),入腸癌細胞株(HT29),骨肉瘤細胞株(刪)和人羊聯細胞橡(wIsH 3生長.其I乙。分別為183、42.L、4L 4印79.;y8/m1’’ 采用MTT法,大花粉蛋白(T翰)對結腸癌、肝細胎竊、4;同分化程度的目癌細胞及rM癌基因陽性細胞(wef)均月高效直接殺傷作用,對肺腺照細胞和nmJe基因陰性細胞(Hef)具輕度抑制作用,對Heh細胞則無作用。流式細胞儀檢測證實天花粉蛋白為胃癌細胞的周期非特異性抑制藥物.透射電鏡表明天花檢蛋臼對胃癌細胞超微結構的損吉主要表現在細胞內質網與線粒體的腫脹變形”i、內天花粉蛋白偶聯單克隆抗體而得的免疫毒京對肝癌細胞毒件很強.對治療dF癌頗具浴AL’?Mj。由天花粉蛋白與抗膩A單抗偶聯物BIJ免疫毒京,體外毒素試驗證實免疫毒家具有殺傷腫瘤細胞作用,對不同腫瘤細胞叭(Bql8G)含員分析,發現這一作用與腫瘤細胞表面c隊含量成正比,體內實驗同樣表明,免疫毒素對潛伏期和生長期的人結腸癌棵鼠移位瘤有明顯的抑瘤作用,其抑面率分別為76%一80%和68%一72%.并能延長荷瘤保鼠生存時間.而對于宿L未州現明顯的毒副反應‘h n內天花粉蛋白和抗人黑色素溜單抗(x876)構建的免疫春京(ys76T撼)對體外培養的人黑色素瘤細胞MM具有強烈的抑制活性,以M為5.6xlo”’M01/LL25]。
3 對免疫系統的影響 天花粉蛋白同時具有免疫刺激和免疫抑制兩種作用。免疫列激作用表現在給小鼠每只每日激服天花粉水煎劑65m矽o.5刮共N可使小鼠脾臟的白髓成分較對照組明顯增殖,生發中心增大,邊緣區增寬,蛤M B淋巴細胞及I洲漿細胞的數量明顯增多,E噬細胞分布區也合所擴大,提示天花粉對脾臟免疫細胞的形成和分化有促進作用“M。小鼠每日激服天花粉水提液o.5創(濃度65心創).共7d,結果表明小民領下腺內PM、Dm受體顯著增加.IRG明顯增多,酸性枯多餡也高于對照組,提示天花粉與促進唾液腺內半乳犢和z胺半乳犢的合成以及增加機體免疫功能有關“M。采用被動皮膚過敏試驗(KA)觀察天花粉蛋白對小鼠rRE抗體生成的影響.結果表明:天花粉蛋白可刺激體狡免疫系統,使機體產生抗天花粉蛋白的IeE抗體,而AI(oH);佐劑可加強這一反應”2M。 天花粉蛋白有免疫抑制作用。c5?B以6N小鼠在接受過敏原卵得蛋白免疫注射的前N先注射不同劑量的天花粉蛋白.通過KA商度的比較觀察天花粉蛋白對182抗體生成的影響,結果表明;用天花粉預處理小民的tsE抗體的產生都比對照組低,t心(258只)的天花粉蛋白就有明顯抑制活性,而且在dm強免疫后的2次應答表現更為顯著‘2M。c5?E財6J4、鼠在腹膠注射4xlo。羊紅細胞(陽Bc)的前2d,腹腔注射天花粉蛋白100K/(25e只),4d后,用改良的溶血空斑試驗對碑膠內的空斑形成細胞(PFc)進行計數,免疫注射后的第7d114dl 21dl分別貿定免疫小鼠血清凝集京的滴度,結果表明天花粉蛋白可顯著抑制PFc的形成和血清凝集家的抗體溶aL“’,以上結果提示天花粉蛋白對體掖免疫有抑制作用。此外.天花粉蛋白也可抑制細胞免疫反應.用c5?BL/6J4、鼠的腺細胞、淋巴細胞和胸腺細胞進行離體細肋培養.發現天花蛋白可抑制刀豆索A(比nA)或植物血凝宏(P以)誘發的淋轉,且抑制強度與劑量直接相關’M m J。采用混合淋i細胞反應(MLR)觀察同種異型抗原對T細胞的特異性激活作用.結果表明;10心m1天花粉蛋白可明顯抑制肌R中的蛋白質、RNA和洲A的生物合成。5’cr釋放試驗也顯示.1階m]天花粉蛋白在體外可明顯抑制同種異型細胞毒T淋巴細胞的初次反應“:Mi。體內試驗表明,給民?BV6J小鼠腹腔注射天花粉蛋白o.2mB/(258只),連續2dt取脾細胞做離體淋巴培養.發現小鼠的陽細胞對bn‘A和脂多德所誘發的淋轉反應表現不同程度的抑制作用.其中bnA的抑制作用比對脂多糖更為明顯。用cM和w盯小民進一步證明.用同樣刑堡的天花粉蛋白1次腹腔注射也可明顯抑制小民對羊紅細胞所產生的遲發型超額反脅”,Mj。 對天花粉蛋白免疫沖制作用機制目前尚個完全清楚。有實財6“U,諧A L16衷M懷石四川M任1別肥蠶1大化財歷漢岡免湛抑制”z:M‘其災疽機制近可能與抑制免疫細胞蛋白的合成Jf關“,j‘b。但天JL粉的免疫抑制作見與淋E細胞表面的(inbA受體無關,也不影響R然只傷細胞(Nx)的活性“Mi,X花粉五(it6發勢15抑制的能力是山中校細胞介導的”、。 4V察天Jt粉蛋白裂解片段(rBTl,)對補體系統有激活作用、抗大Jt粉蛋白單抗體可不向程度地抑制這種徽活作用。提人k/E粉蛋白裂解X段皿,z對補體的激活作用與它的抗原決定甚JI丈.啪4花粉蛋內單抗體與c叮,2的抗原決定基結合后,封閉f灣激活補體的功能,天花粉蛋白的致補體激活作用的活性展Ld,Jf能在叭,?序列內”M。應用交叉免疫電泳將其村補體(1的澈活程度進行半定員分析,結果發現又花粉蛋白經胺裂解后純化所狡別、::片段如同大花粉蛋白完整分f樣對補體q均有激活作用”—從天花粉小還分離出免疫抑制件蛋白“M。 ‘抗艾滋病病毒 體外試驗表明,天花粉蛋白可抑制艾滋病病?3(HIv)在感染的免疫細胞內的復制,減少免疫細胞中受炳葷感染的活細胞效,其百效燦制濃度為o.05—10 Pg/訓M:dM。臨床資料表明.用結晶純天花粉蛋白針劑治療后.忠各c以細胞數呈L升趨勢,血清Mv抗原水平下降,呈一定的治療效孵“i。天花粉有很強的抑制人免疫缺陷病毒(H[v)的DNA復制和蛋白質合成的作用”?。 ?種能抑制HIv感染相復制的蛋白質i從天花粉中分離、純化得到,這種蛋自質被休為抗—HIvTAR9MM。1:400天花粉煎劑對猴免疫缺陷病毒(slv)亦有明顯的抑制作用”M。 付十天花粉蛋白抗Htv的機制.U前有如下認識;①作用于受HIv感染的單核一巨噬細胞內Htv復制特別有效”M。②抑制行咆體的形成,1PB/m1的天花粉蛋白可抑制80%合胞體的形成、2P8/M[則可全部抑制”M。此外,文滋病人靜脈滴注天花暢蛋F12次U上之后.c以細胞數開始明顯回升‘M,也提示這 ‘機制起作用的可能‘②誘發免疫抑制和殺傷.其誘發免疫抑制作用通過LM細胞發揮作用”M。
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